การยับยั้งการแสดงออกของยีน usp14 ด้วยเทคนิคการยับยั้งอาร์เอ็นเอในเซลล์ปฐมภูมิของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี
Journal Title
การยับยั้งการแสดงออกของยีน usp14 ด้วยเทคนิคการยับยั้งอาร์เอ็นเอในเซลล์ปฐมภูมิของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี
Authors
Recommended by
Abstract
การวิจัยครงนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อยับยั้งการแสดงออกของยีน Ubiquitin- Specific Protease 14 ด้วยเทคนิค RNA interference (RNAi) โดยจากการศึกษาที่ผ่านมาพบเปลี่ยนแปลงของยีนใ ผู้ป่วยชาวไทยทเป็นมะเร็งท่อน้ำดีที่อยู่ในตับด้วยวิธีการขยายยีนแบบสุ่ม (AP-PCR) พบส่วนของ ดีเอ็นเอที่มีความจำเพาะกับโรคมะเร็งท่อน้ำดอยู่บนยีน Ubiquitin- Specific Protease 14 หรือ usp14 บนโครโมโซม 18 ซึ่งแถบดีเอ็นเอดังกล่าวมีการเปลี่ยนแปลงรอยู่ละ 52 ดังนั้น การศึกษาวิจัยในครั้งนี้เพื่อยับยั้งการแสดงออกของยีนดังกล่าว ด้วยเทคนิค RNA interference หรือ RNAi ในเบื้องต้นได้ทําการออกแบบโอลโกสายส้น (oligoduplex RNAi) แล้วทำการนำเข้าสู่เซลล์ปฐมภูมิ (Primary cell) ของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี (transfection) เปรียบเทียบกับ RNAi negative ซึ่งใช้เป็นตัวควบคุมแล้วทำการศึกษาการแสดงออกของยีนในระดับอาร์เอ็นเอ ด้วยเทคนิค quantitative real-time PCR ผลการวิจัยพบว่า RNAi ที่ออกแบบไว้ยับยั้งการแสดงออกของยีน usp14 ในเซลล์ปฐมภูมิของเซลลมะเร็งท่อน้ำดีในเวลา 24 ชั่วโมง ได้ร้อยละ 56 – 95 จากผลการวิจัยทำให้ทราบว่า โอลโก RNAi ที่ได้ออกแบบไว้สามารถยับยั้งการแสดงออกของยีน usp14 ได้จริง อย่างไรก็ตาม เนื่องจากข้อจำกัดด้านการเจริญของเซลล์ปฐมภูมิของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี ทําให้ไม่สามารถศึกษาสภาวะการลุกลามของเซลล์ปฐมภูมิหลังจากถูกยับยั้งยีน usp 14 จากกการทีเอ็นไซม์ Ubiquitin specific protease 14 (USP14) ทําหน้าที่ควบคุมความยาวของสายโปรตีนควบคุมที่ชื่อว่า Ubiquitin ด้วยความที่โปรตีนนี้ทําหน้าที่เป็นตัวควบคุมภายในเซลล์จึงมีแนวโน้มที่จะนำไปใช้ทางการแพทย์