ความหลากหลายทางชนิด การแพร่กระจาย ตัวอาศัย และสารซึ่งมีคุณสมบัติทางยาของเชื้อราสาเหตุโรคแมลงในสกุล Ophiocordyceps (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) ในอุทยานแห่งชาติดอยอินทนนท์ จังหวัดเชียงใหม่ (ระยะที่ 2)
Journal Title
ความหลากหลายทางชนิด การแพร่กระจาย ตัวอาศัย และสารซึ่งมีคุณสมบัติทางยาของเชื้อราสาเหตุโรคแมลงในสกุล Ophiocordyceps (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) ในอุทยานแห่งชาติดอยอินทนนท์ จังหวัดเชียงใหม่ (ระยะที่ 2)
Authors
Recommended by
Abstract
การวิจัยในครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความหลากหลายทางชนิดของเชื้อราสาเหตุโรคของแมลงในสกุล Ophiocordyceps (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) ในพื้นที่อุทยานแห่งชาติ ดอยอินทนนท์ในจังหวัดเชียงใหม่ (ระยะที่ 2) โดยการสำรวจและรวบรวมตัวอย่าง ระบชื่อ วิทยาศาสตรพบว่าสวนใหญ่เป็น Ophiocordyceps nutans รองลงมาคือ O.myrmecophila และ O.sphecocephala ตามลำดบ ส่วน O.irangiensis และที่ไม่สามารถระบุชื่ออีก 3 สปีชี่ส์ คือ Ophiocordyceps sp.1 Ophiocordyceps sp.2 และ Ophiocordyceps sp.3 นำตัวอย่างที่รวบรวมได้มาแยกเชื้อบริสุทธิ์โดยวิธี single spore isolation และ tissue culture จากนั้นนำเชื้อบริสุทธิ์ที่แยกได้ไปเพาะเลี้ยงเพื่อหาสภาวะที่เหมาะสมต่อการเจริญเติบโตในอาหารวันที่มีสูตรอาหาร อุณหภูมิ และ pH ต่าง ๆ เป็นเวลา 15-60 วันในที่มืด พบว่าเชื้อบริสุทธิ์ของ Ophiocordyceps ทุกสปีชี่ส์เจริญได้ดีในอาหาร potato dextrose agar ที่อุณหภูมิ 25° C และที่ pH ในช่วง 5-6 และ สามารถสร้างโครงสร้างสัมพันธ์แบบเทียมได้ แต่ O.nutans ไม่พบการสร้างโครงสร้างสัมพนธ์แบบเทียม เมื่อนำเชื้อ Ophiocordyceps มาวิเคราะห์ความหลากหลายทางพันธุกรรมภายในประชากร เชื้อด้วยเทคนิค amplified fragment length polymorphism (AFLP) และ repetitive sequence based polymerase chain reaction (rep-PCR) ด้วยไพรเมอร์ REP และ ERIC เมื่อนำลายพิมพ์ดี เอ็นเอมาวิเคราะห์ความเหมือนด้วย Dice’s coefficient และจัดกลุ่มด้วยวิธี unweighted pair group method with arithmetic averages (UPGMA) ที่ค่า similarity 0.80 พบว่าเทคนิค AFLP, Rep-PCR ไพรเมอร์ REP และ ERIC มีค่า cophenetic correlation (r) เท่ากับ 0.95180, 0.95928 และ 0.85325 ตามลำดับ โดยผลการศึกษาความสัมพันธ์ของเชื้อด้วยเทคนิค AFLP และ rep-PCR ด้วยไพรเมอร์ REP ให้ผลส้อดคล้องกัน ซึ่งชี้ให้เห็นถึงความหลากหลายทางพันธุกรรมของเชื้อ Ophiocordyceps มีความหลากหลายทางพันธุกรรมสูง ซึ่งอาจเป็นผลมาจากระบบนิเวศของพื้นที่มีความหลากหลายแตกต่างกัน